Фармацевтическая химия и фармакогнозия - кейс 122 — задача № 122

Правильный ответ: вестерн-блот

• вестерн-блот

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод вестерн-блот, один из вариантов иммуноблоттинга, который используют для оценки подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов (ИЛП) на основе высокоочищенных белков, в том числе, полученных по технологии рекомбинантной ДНК»
  
  ОФС. 1.8.1.0002.15 Иммунобиологические лекарственные препараты
  
  «ИЛП могут содержать … гликопротеины; антитела к ним и другие действующие вещества биологического происхождения (например, цитокины, моноклональные антитела, …)

Правильный ответ: додецилсульфата натрия

• додецилсульфата натрия

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод молекулярной биологии и биохимии – электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ), используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот, который основан на движении заряженных биологических макромолекул в постоянном электрическом поле. … Электрофорез в полиакриламидных гелях с использованием натрия додецилсульфата (SDS) – наиболее распространенный способ электрофореза, используемый для оценки подлинности и чистоты белковых продуктов. … SDS-полипептидные комплексы мигрируют через полиакриламидные гели с подвижностью, прямо пропорциональной молекулярной массе полипептида.»

Правильный ответ: Кумасси бриллиантовый R250

• Кумасси бриллиантовый R250

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле (ГФ ХIV)
  
  «Окрашивание Кумасси бриллиантовым R250 – наиболее распространенный метод окрашивания белков с пределом обнаружения порядка от 1 до 10 мкг белка в полосе.»

Правильный ответ: комнатной температуре

• комнатной температуре

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот (ГФ XIV)
  
  «Затем мембрану обрабатывают раствором первых антител к анализируемому белку, приготовленным с использованием буферного раствора для антител (если нет других указаний в фармакопейной статье или нормативной документации) непосредственно перед использованием в соответствии с инструкцией по применению. Обработку антителами проводят при комнатной температуре»

Правильный ответ: Кумасси

• Кумасси

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Окрашивание Кумасси бриллиантовым R250 – наиболее распространенный метод окрашивания белков с пределом обнаружения порядка от 1 до 10 мкг белка в полосе.»

Правильный ответ: подлинность и чистота

• подлинность и чистота

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот (ГФ XIV)
  
  «Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод вестерн-блот, один из вариантов иммуноблоттинга, который используют для оценки подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов (ИЛП)»

Правильный ответ: молекулярных масс распределены равномерно по всей длине соответствующей дорожки геля

• молекулярных масс распределены равномерно по всей длине соответствующей дорожки геля

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Результаты метода вестер-блот могут учитываться, если: маркеры молекулярных масс распределены равномерно по всей длине соответствующей дорожки геля…»

Правильный ответ: соответствие содержания выявляемой примеси в стандартном образце диапазону, установленному в свидетельстве на стандартный образец

• соответствие содержания выявляемой примеси в стандартном образце диапазону, установленному в свидетельстве на стандартный образец

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Критерии приемлемости результатов … соответствие содержания выявляемой примеси в стандартном образце диапазону, установленному в свидетельстве на стандартный образец»

Правильный ответ: изменение уровня освещенности помещения

• изменение уровня освещенности помещения

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Валидации подлежат следующие изменения: использование различного количества наносимых на гель проб; изменение условий переноса белков с геля на мембрану, включая изменение используемого оборудования; изменения состава буферных растворов; изменение способа детекции исследуемого вещества.»

Правильный ответ: нитроцеллюлозная

• нитроцеллюлозная

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  « … белки переносят на нитроцеллюлозную мембрану или PVDF-мембрану (мембрана из поливинилденфторида).»

Правильный ответ: щелочной фосфатазой или пероксидазой хрена

• щелочной фосфатазой или пероксидазой хрена

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот (ГФ XIV)
  
  «В качестве вторых антител используют поликлональные антитела к иммуноглобулинам того вида животного, которое использовалось для получения первых антител. Данные антитела конъюгированы с ферментом (пероксидаза из корней хрена или щелочная фосфатаза).»

Правильный ответ: фармацевтические субстанции или готовая продукция

• фармацевтические субстанции или готовая продукция

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Испытание проводят с фармацевтическими субстанциями или с готовой продукцией»