Вирусология - кейс 32 — задача № 32
В лабораторию поступил образец (мазок из носа) от пациента, вернувшегося из Китая с признаками ОРВИ, где регистрируют случаи инфицирования людей вирусами гриппа птиц. Необходимо провести тестирование образца на наличие вирусов гриппа человека и птиц методом ПЦР. С этой целью необходимо знать все этапы пробоподготовки, проведения ПЦР и анализа полученных результатов.
УСЛОВИЕ СИТУАЦИОННОЙ ЗАДАЧИ
Ситуация
В лабораторию поступил образец (мазок из носа) от пациента, вернувшегося из Китая с признаками ОРВИ, где регистрируют случаи инфицирования людей вирусами гриппа птиц. Необходимо провести тестирование образца на наличие вирусов гриппа человека и птиц методом ПЦР. С этой целью необходимо знать все этапы пробоподготовки, проведения ПЦР и анализа полученных результатов.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: в холодильнике при температуре +2-4°С
- в холодильнике при температуре +2-4°С
Допускается хранение носоглоточного образца в течение 7 суток в холодильнике при температуре 2-4°С.
МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». Пункт 3.8.
МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности"
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: экстракции нуклеиновых кислот (НК)
- экстракции нуклеиновых кислот (НК)
Образец, поступивший в лабораторию для ПЦР диагностики гриппа, передается в рабочую зону для первичной пробоподготовки и регистрации материала для экстракции нуклеиновых кислот (НК).
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции» (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 5.2.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: в боксах биологической безопасности II и III класса защиты или настольных боксах с бактерицидной лампой (ПЦР-бокс, УФ-бокс)
- в боксах биологической безопасности II и III класса защиты или настольных боксах с бактерицидной лампой (ПЦР-бокс, УФ-бокс)
Все манипуляции с РНК биологического материала необходимо проводить в боксах биологической безопасности II и III класса защиты или настольных боксах с бактерицидной лампой (ПЦР-бокс; УФ-бокс)
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции» (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 5.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: расходные материалы, имеющие маркировку свободные от РНКаз
- расходные материалы, имеющие маркировку свободные от РНКаз
При манипуляциях с РНК вируса гриппа используют одноразовые стерильные расходные материалы, имеющие маркировку свободные от РНКаз.
МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». Приложение 2.
МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности"
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: отрицательный и положительный контроли экстракции
- отрицательный и положительный контроли экстракции
На этапе проведения экстракции РНК рекомендовано использовать дополнительные контрольные образцы, такие как отрицательный и положительный контроли экстракции (если предусмотрены набором реагентов).
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции» (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 6.2.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: лизирующий
- лизирующий
Для первичной обработки, обеззараживания биологического материала и последующей экстракции РНК вируса гриппа образец добавляют в лизирующий раствор.
МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». Приложение 5, пункт 2.2.2.
МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности"
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: обратной транскрипции (ОТ)
- обратной транскрипции (ОТ)
Для получения кДНК, комплементарной РНК вируса гриппа, необходимо проведение обратной транскрипции (ОТ).
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 6.2.2.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: необходимо незамедлительно
- необходимо незамедлительно
После выделения РНК вируса гриппа необходимо проводить следующий этап незамедлительно.
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 6.2.2.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: амплификатор
- амплификатор
ПЦР проводят на амплификаторе.
МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». Приложение 2.
МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности"
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: обратную транскрипцию и амплификацию
- обратную транскрипцию и амплификацию
К этапам ПЦР, которые могут быть совмещены в одной реакции, относят обратную транскрипцию и амплификацию.
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 6.2.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: 12
- 12
Очищенная ДНК может храниться при температуре минус 24 – минус 16 в течение 12 месяцев.
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 6.2.
Посмотреть ответ и обоснования из источника
Правильный ответ: контроли не демонстрируют рост кривых и не пересекают пороговую линию, а в случае положительных контролей наблюдается рост кривых флуоресценции и пересечение пороговой линии
- контроли не демонстрируют рост кривых и не пересекают пороговую линию, а в случае положительных контролей наблюдается рост кривых флуоресценции и пересечение пороговой линии
В результате ПЦР в реальном времени регистрируют рост кривой и пересечение пороговой линии по каналу для детекции возбудителя. Результат будет считаться достоверным, если все отрицательные контроли не демонстрируют рост кривых и не пересекают пороговую линию, а в случае положительных контролей наблюдается рост кривых флуоресценции и пересечение пороговой линии.
МР 3.1.0117-17 «Лабораторная диагностика гриппа и других ОРВИ методом полимеразной цепной реакции (разработаны и утверждены Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека), 2018. Пункт 6.5.
Формулировки, ответы и обоснования приведены по исходному банку учебных материалов для подготовки к аккредитации.
Источники: База приложения «Аккредитация медработников» (09.09.2026)