Фармацевтическая химия и фармакогнозия - кейс 33 — задача № 33

Правильный ответ: трёхмерная

• трёхмерная

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Трехмерная структура белков часто поддерживается за счет дисульфидных связей. Цель анализа SDS-ПААГ в восстанавливающих условиях состоит в том, чтобы разрушить эту структуру путем расщепления дисульфидных связей.»

Правильный ответ: смесей белков и для обнаружения примесей, которые могут иметь подвижность, близкую к подвижности главного компонента

• смесей белков и для обнаружения примесей, которые могут иметь подвижность, близкую к подвижности главного компонента

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Метод диск-электрофореза, благодаря своей высокой разрешающей способности, рекомендуется для характеристики смесей белков и для обнаружения примесей, которые могут иметь подвижность, близкую к подвижности главного компонента.»

Правильный ответ: электрическое поле

• электрическое поле

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод молекулярной биологии и биохимии – электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ), используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот, который основан на движении заряженных биологических макромолекул в постоянном электрическом поле.»

Правильный ответ: того же знака, что и фракционируемые молекулы ; не взаимодействуют с ними ; несколько ниже

• того же знака, что и фракционируемые молекулы ; не взаимодействуют с ними ; несколько ниже

  «Для наблюдения за процессом в исходный препарат добавляют краситель, молекулы которого несут электрический заряд того же знака, что и фракционируемые молекулы, но не взаимодействуют с ними, причем скорость миграции наиболее подвижных макромолекул пробы должна быть несколько ниже, чем у молекул красителя.»

Правильный ответ: обеспечения полной денатурации

• обеспечения полной денатурации

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Обычно для обеспечения полной денатурации образец в смеси с буферным раствором подвергают дополнительно температурной обработке, режим которой должен быть указан в фармакопейной статье или нормативной документации.»

Правильный ответ: достигает нижнего края геля

• достигает нижнего края геля

  ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле
  
  «Когда индикатор достигает основания геля, электрофорез останавливают»

Правильный ответ: первые

• первые

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Детекцию проводят с помощью специфичных к определяемому белку антител, конъюгированных с щелочной фосфатазой или пероксидазой хрена (прямой вариант ИФА), или последовательно с помощью первых антител к определяемому белку, и вторых антител (так называемой, антиглобулиновой сыворотки), специфичных к иммуноглобулину первых антител, конъюгированных с щелочной фосфатазой или пероксидазой хрена (непрямой вариант ИФА).»

Правильный ответ: поликлональные анти-мышиные антитела

• поликлональные анти-мышиные антитела

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот (ГФ XIV)
  
  «В качестве вторых антител используют поликлональные антитела к иммуноглобулинам того вида животного, которое использовалось для получения первых антител.»

Правильный ответ: в спиртовом растворе 10-15 минут, 5 минут в деионизированной воде, а затем 5 минут в буфере для переноса

• в спиртовом растворе 10-15 минут, 5 минут в деионизированной воде, а затем 5 минут в буфере для переноса

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «При использовании PVDF-мембраны ее необходимо выдержать в растворе метанола или спирта в течение 10-15 мин, а затем произвести аналогичные действия, что и для нитроцеллюлозной мембраны.»

Правильный ответ: проявление картины иммуноблота

• проявление картины иммуноблота

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Проявление картины иммуноблота на мембране проводят раствором тетраметилбензидинового субстрата (ТМВ) для антител, конъюгированных с пероксидазой хрена, или раствором для проявления щелочной фосфатазы – при использовании антител, конъюгированных со щелочной фосфатазой (если нет иных указаний в фармакопейной статье или нормативной документации).»

Правильный ответ: белки

• белки

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «Для проведения переноса белков используют прибор для переноса белков. Все работы проводят в резиновых перчатках. Объем всех используемых растворов должен быть достаточен для полного погружения мембраны, на которую переносят белки.»

Правильный ответ: была обращена к аноду

• была обращена к аноду

  ОФС.1.7.2.0022.15 Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот
  
  «На мембрану помещают от одного до трех листов фильтровальной бумаги, предварительно смоченных в растворе для переноса белков, и сверху прикрывают второй специальной губкой, смоченной в растворе для переноса белков. Рамку скрепляют зажимами и медленно погружают в прибор для электрофореза, заполненный раствором для переноса белков, лист мембраны должен быть обращен к аноду.»